sds page凝胶电泳_sdspage凝胶电泳基本原理10

SDS-PAGE凝胶电泳技术

SDS-PAGE凝胶(jiāo )电泳，即聚丙(bǐng )烯酰(🏧)胺(àn )凝胶电(diàn )泳，是生物化(🔻)学和分子生物学实验中常(cháng )用的蛋白质(zhì )分离和(🤚)鉴定技术，这项技术的基本原(🤘)理是利用(yòng )蛋(dàn )白(bái )质在电场中的迁移(yí )率与其分子量成反比的关系，通过添加阴(🈸)离(lí )子洗涤剂SDS（十二(èr )烷(wán )基(jī )硫酸钠）使蛋白质带上负电荷，从而消除了蛋白质原有的电荷差异，使得蛋白质的迁移仅(jǐn )受其大小的(de )影响。

操作(zuò )步(bù )骤方面(miàn )，首(⚾)(shǒu )先需要制备适当浓度和pH值(zhí )的聚丙烯酰胺凝(🏵)胶，然后将含有SDS和还原剂的蛋白(bái )质样品加入(rù )凝胶孔中，通电后(hò(🚙)u )，蛋白质开始根据大小分离，小分子蛋白(bá(🐼)i )质移动得更快(㊙)，而大分子蛋白质则(zé )较(🤛)慢，通过染色或(🧓)西方印迹等方法可以检测和分析蛋白质。

应用范围广泛(fàn )，SDS-PAGE不仅用于蛋白质分子(zǐ )量的测定，还广泛应(📘)用(yòng )于蛋白质纯化程度的(😓)分析、蛋(🏅)白质变性和(🔌)复性研(📟)究以及蛋白质-蛋白(😑)质相互(hù )作用的研究，它也是研究蛋白质翻译后修饰的重要工具。

尽管SDS-PAGE是(shì )一种强大的分析工具，但它也(yě )有(🙍)局限性，对于极端大小的蛋白质，分辨率可(kě )能(néng )会降低；某些蛋白质可能因为(🏊)结构的特殊性而在(⚽)凝胶中的迁移不(bú )符(📓)(fú )合预期，在进(jìn )行SDS-PAGE分析时，通常需要(🍴)(yào )结合(hé )其他生化(huà )和(hé )分(fèn )子生物学技术以获得更(🐤)(gèng )准确(🌃)的结果。