sds page凝胶电泳_sdspage凝胶电泳基本原理6

SDS-PAGE凝(🔆)胶电泳技术

SDS-PAGE凝胶电泳，即聚丙(🙃)烯酰胺凝(níng )胶电泳，是生物化学和分子(zǐ )生物学实验中常用的蛋(dàn )白质分离(📊)和鉴定(🔶)技术，这项技术的基本原理(🧚)是利用蛋白质在电(🐻)场中的迁移率与(yǔ )其分子量成反比的关系，通过添加阴离子洗涤剂SDS（十二烷基硫(liú )酸钠）使蛋白质带上负电荷，从而消(🖤)除了(👉)蛋白(bái )质原有的电荷差异，使(shǐ )得蛋白质(🏗)的迁(qiān )移仅受(🔤)(shòu )其大小的影响。

操作步骤(zhòu )方面，首(shǒu )先需要制备适当浓度(dù )和pH值的聚(jù )丙(🚷)烯酰胺凝胶，然后将含(hán )有SDS和还原剂的蛋白质样品(pǐn )加入凝胶孔中，通电后，蛋(dàn )白质开始(🍲)(shǐ )根据大小分(🏑)(fèn )离(lí )，小分子(🍘)蛋(dàn )白质移动得更快，而大分(💲)子蛋白质则较慢，通过染色或西方印(💀)迹等方法可(kě )以(yǐ )检测和分析(xī )蛋白(➡)质。

应用范围广泛，SDS-PAGE不仅用于蛋(dàn )白质分子量的测定(💺)，还广泛应用于蛋白质纯(chún )化程度的分(🛄)析、蛋白质变性和(hé )复性研究以及蛋白质-蛋白质相(🌩)互作(zuò )用的(de )研究，它也是(shì )研究蛋(dàn )白质翻(fān )译后修饰的重要工具。

尽管SDS-PAGE是一种强大的分(fèn )析工具，但它也有局(🧔)(jú )限性，对于极端大小的蛋白(bái )质，分(➿)辨率可能会降低；某些(xiē )蛋白质可(kě )能(🔈)因为结(jié )构的特殊性(xìng )而在凝胶中的迁移不符合预(🔋)期，在进行SDS-PAGE分析时，通常需(xū )要结(jié )合其他生化(huà )和分子生物学技术以获(huò )得更准确的结果。