SDS-PAGE凝(níng )胶(jiāo )电(🕧)(diàn )泳技术
SDS-PAGE凝胶电泳,即聚丙烯酰胺凝胶电(diàn )泳,是(shì )生物化(huà )学和分子生物学实验中(zhōng )常用的蛋白质分离和鉴定技术,这项技术的基本原(yuán )理(❕)(lǐ )是(shì )利用蛋白质在电场中(zhōng )的迁移率与其分子量成反比的关系,通过添加阴离子洗涤剂SDS(十二(èr )烷基(🧘)硫酸钠)使蛋白质带上负电荷,从而消除(chú )了蛋白(🏿)质原有(yǒu )的电荷(❄)差异,使(shǐ )得蛋白(bái )质的迁移仅受其大小的影响。
操作步骤方面,首先需要制备适当浓度和pH值的聚丙(bǐng )烯酰胺凝胶,然后将含有(🍚)SDS和还原剂的蛋白质样品加入凝胶孔中,通电后,蛋(dàn )白(bái )质开始根(💅)据大小分离,小分子蛋白质(🍊)移动得更(gèng )快,而(ér )大分子蛋白质则较(jiào )慢,通过染色或西方(fāng )印迹(jì )等方法可(😗)以检(🐞)(jiǎn )测和分析蛋(dàn )白(bái )质。
应用范围广泛,SDS-PAGE不仅用(yòng )于蛋白质分子量(🙊)的测定,还广泛应(🍀)(yīng )用于(🚁)蛋白质纯化程(chéng )度的分(fèn )析、蛋白(bái )质变(🚿)性和复性研究以(🈯)及蛋白质-蛋白质相互作用的研究,它也是(🧗)研究蛋白质翻译后修饰的重要工具。
尽管(😓)SDS-PAGE是一种强大(dà )的分析工具(🌌),但它也(✴)有局限性,对于极端大小的蛋白质,分辨率可能(❣)会降低;(🥈)某些蛋白(🚦)(bái )质(zhì )可能因为结构的特殊性而在凝胶中的迁移不符合(🍮)预期,在进(jìn )行SDS-PAGE分析时,通常需要结合(🔪)(hé )其他生化和(hé )分子生(shēng )物学技术以获得(dé )更准确的结(jié )果。
视频本站于2024-09-23 12:09:28收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。