SDS-PAGE凝胶电泳技术
SDS-PAGE凝(🌖)(níng )胶电泳,即聚丙烯酰胺凝胶电(diàn )泳(🛰),是生物化(huà )学和分(fè(🎳)n )子生物学实验中常(cháng )用的蛋白质分离(lí )和鉴定技术(shù ),这项技术的基(💫)本原理(🐁)是利用(yò(🗣)ng )蛋白质在电场中的迁移率与(yǔ )其分子量成反比的(❣)关系,通过(guò )添加阴离子(zǐ )洗涤(dí )剂SDS(十二烷(wán )基硫酸钠)使蛋白质(🔚)带上负电荷,从而(ér )消除了(le )蛋白质原有(yǒ(🎗)u )的电荷差异,使得蛋白质的迁移仅受其大小的影响。
操作步骤方面,首先需要制备(bèi )适当浓度和pH值的聚丙烯酰胺(àn )凝胶,然后将含有SDS和还原剂(jì )的蛋白质样品加(♉)入凝胶孔中,通(tōng )电后,蛋(🧙)白质开始根据大小分离,小(xiǎo )分子(📱)蛋白质(zhì )移动得更(gèng )快,而大分子蛋(dàn )白质则较慢,通过染色或西方印迹等方(🀄)法可以检测和分析蛋白质(zhì(😳) )。
应用范围广泛,SDS-PAGE不仅用于蛋(😗)白质分子量的(de )测定,还广泛应用于蛋白质纯(✂)化程度的分析、(🔻)蛋白质(🐧)(zhì )变性和复(🤐)性研究以及蛋白质-蛋白质相互作用的(de )研究,它(tā(🐁) )也(yě )是研究蛋白质翻(fān )译后修饰的重要工具。
尽(jìn )管SDS-PAGE是(shì )一种强大的分析工具,但它也有局限性,对于极端大小的蛋白质,分辨率可能会降(⏺)低;某些蛋白(🐅)质可(kě )能因为(wéi )结(jié )构(gò(🐝)u )的特殊性而在凝胶中(zhōng )的迁移不符合(🏬)预期,在进行SDS-PAGE分析时,通常需要结合其他生化和分子生物(wù )学技术以(yǐ )获得更准确的结(jié )果。
视频本站于2024-09-20 09:09:57收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。