SDS-PAGE凝胶电泳技术(shù )
SDS-PAGE凝胶电泳,即聚(jù )丙烯酰胺凝胶电泳(yǒng ),是生物化学和分子生物学实(📵)验中常(🚑)(cháng )用的蛋白质分离和鉴定技术,这项技术的基本原理是利(lì )用蛋白质(zhì )在电场中的迁移率与其(qí )分子量成反(👛)比的关系,通过添(tiān )加阴离子洗涤剂SDS(十(🛳)二烷基硫酸钠)使蛋白质带(🕠)上负电荷,从而消(🏉)除(chú )了蛋白(bái )质原(yuán )有的电荷差异,使得蛋白质的(de )迁(🍹)移(yí )仅(😸)受其大小的影响。
操(🔳)作步骤方面,首先需(xū(🗜) )要制备适当浓度和(hé )pH值的聚丙烯酰(xiān )胺凝(níng )胶,然后将(🗂)含有SDS和还原剂的蛋白质样品加入凝胶孔中,通电后,蛋白质开始(shǐ )根据大小分离,小分子蛋白质移动得更快,而大分子蛋白质则较慢,通过染色或西方(fāng )印(yìn )迹等方法(fǎ )可以(yǐ )检测(cè )和分析蛋(dàn )白质。
应用范围广泛,SDS-PAGE不仅用于蛋(dàn )白质分子量(liàng )的测定,还广泛(fàn )应用于蛋白质纯化程度的分析、蛋白质变性(xìng )和复性研究以及蛋白质-蛋(⏺)白质相(xiàng )互(👏)作用的研究,它也是研究(📰)蛋白质翻译(yì )后修饰的重要工具。
尽(🔎)管SDS-PAGE是一(🤔)种(🌑)强大(🥥)(dà )的分(fèn )析工(gōng )具,但它也有(yǒu )局限(xiàn )性,对(🛣)于极端大小的(🌒)(de )蛋白质,分辨率可(kě )能会(huì )降低;某些蛋白质可(kě )能因为结(🎷)构的特殊性而在凝胶(jiāo )中的迁移不符合预(🐈)期,在进行SDS-PAGE分析时,通常需要结合其他生化(👘)(huà )和分(🦗)子生物(wù )学技术以获得更准确的结果。
视频本站于2024-09-21 08:09:11收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。