SDS-PAGE凝(níng )胶(⚡)(jiāo )电泳技术
SDS-PAGE凝胶(🙃)电泳,即聚丙烯(xī )酰胺凝胶电泳,是生物化学和分(fèn )子生物学实验(📝)中常用的蛋白质(zhì )分离和鉴(jiàn )定技术,这项技术的(🤠)基本原理是(shì )利用蛋白质在电场中的(de )迁移率与其分子量成反比的关系,通过添加阴离子洗涤(dí )剂SDS(十二烷基硫(🍙)酸钠)使蛋白质(😽)带上负电荷,从(cóng )而消除了蛋白质原有的(👘)电荷差异,使得蛋白质的迁移(yí )仅(jǐn )受其大小的影响。
操作步(bù )骤方(fā(🐣)ng )面,首(🌓)(shǒu )先需(xū )要(yào )制备适(shì )当浓度和pH值的聚丙烯酰胺凝胶(jiāo ),然后将(jiāng )含有SDS和还原剂(♈)的蛋白质样品加入凝胶孔中,通电后,蛋白质开始根据(🎙)大(dà )小分离,小(xiǎo )分子蛋白质移动(🌯)得(dé )更快,而大分子蛋白质(zhì )则较(jiào )慢,通过染色(sè )或西方印迹等方法可以检测和分析蛋(🍾)(dàn )白质(🍮)。
应用范围广泛,SDS-PAGE不仅用于蛋白质分子量的测定,还广泛应用(yòng )于(yú )蛋白质纯化(huà )程度的(de )分析(xī )、蛋(⏳)白(bái )质变性和复性(🍏)研究(jiū )以(🐍)及蛋白质-蛋白质相互作用的研究,它也(yě )是(shì )研究蛋白质翻译(🐱)后修饰(shì )的重要工(gōng )具。
尽管SDS-PAGE是一种强大的分析工具,但它也有局限性,对于(🤦)极端(duān )大小的(de )蛋白质(🎬),分辨率可能会降低;某些蛋白质可(kě )能因为结构的特殊性而在凝胶中的迁移不符合预期,在进行SDS-PAGE分析时,通常需要结合其他生(shēng )化和分子生物学技术以获得更准确的结果。
视频本站于2024-11-01 05:11:50收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。