SDS-PAGE凝(níng )胶电泳技术
SDS-PAGE凝(níng )胶电泳,即聚丙烯酰胺凝胶电泳,是生物化学和分子(zǐ )生物学(xué )实验中常用的蛋白(bái )质分离和鉴定技(jì )术,这项技术的基本原理是利用蛋白质在电场中的(de )迁移率与其分(📻)子量成反比的(de )关系(xì ),通过添(tiān )加阴离子洗(xǐ )涤剂SDS(十二烷基硫酸钠(🔣))(👫)使蛋白质带(🎰)上负电荷(hé ),从而消除(chú )了蛋白质原有的电(diàn )荷差异,使得蛋白质的迁(qiān )移仅受其大小的影响。
操作(🆓)步骤方面(📕),首先需(xū )要制备适(🧛)当(dāng )浓度(🛂)和pH值的聚丙烯酰胺凝胶,然后(hòu )将含(📉)有SDS和还原(🐊)剂的蛋白质样品加入凝胶孔中,通电后,蛋(🚤)白质开始根(gēn )据大小分(😊)离,小分子蛋(dàn )白(bái )质移动得更(gèng )快,而大分子蛋白(bái )质则较慢,通过染色或西方印迹(jì )等方法(fǎ(💈) )可(🥞)(kě )以检测和分析蛋白质。
应用范(📔)围广泛(fàn ),SDS-PAGE不仅用(yòng )于蛋白质分子(zǐ )量的测定,还广泛应用(🌏)于蛋白质纯化程度的分(fèn )析、蛋白质变性和复性研究以(yǐ )及蛋白质-蛋白(bái )质相互作用的研究,它也是研究蛋白质(zhì )翻译后修饰的重(🎵)要工(❔)(gōng )具。
尽管SDS-PAGE是(shì )一种强(qiáng )大的分析工具,但它也(yě )有局限性,对于极(🛰)端大小的蛋(dàn )白(🚆)质,分(fèn )辨率可能会降低;某些蛋白质可能因(yīn )为结构(gòu )的特殊性而在凝(🌈)(níng )胶中的迁移不符(fú )合预期,在进行SDS-PAGE分析时,通常需要(yào )结合其他生化和分子生物学技术以获得更准确的结果。
视频本站于2024-11-02 05:11:30收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。